14ª PRÁCTICA
19/02/2020
PRÁCTICA Nº14: "ESTUDIO MICROSCÓPICO DE PRINCIPIOS INMEDIATOS EN HECES"
OBJETIVO
La investigación de los principios inmediatos que aparecen digeridos en las heces debe realizarse a nivel macroscópico y microscópico.
El análisis de las heces de un paciente puede darnos información sobre la función digestiva, así como valiosas orientaciones diagnósticas que van desde la detección precoz de un carcinoma de colon-recto (sangre oculta en heces), hasta la identificación de síndromes de malabsorción (grasa en heces).
FUNDAMENTO
En las heces podemos observar con facilidad el grado de digestión de los distintos principios inmediatos, de modo que este examen microscópico es de gran ayuda en el diagnóstico de los distintos tipos de patologías relacionadas con el proceso de la digestión.
APARATAJE
1) PREPARACIÓN REACTIVOS
- Lugol:
Usamos una dilución al 1/3 con 5 mL de Lugol y 10 mL de agua destilada y lo mezclamos bien en un matraz Erlenmeyer. Posteriormente fue alicuotado para cada grupo de la clase.
- Sudán III:
Se han mezclado 0.5 g de Sudan III con 45 mL de etanol 96º. Posteriormente, calentar brevemente en el microondas y dejar enfriar. Una vez frío, filtrarlo y realizar alícuotas para cada grupo de clase.
2) TÉCNICA
1º) Disolución de heces sin adulterar (en fresco). Se observan fibras vegetales:
2º) Disolución de heces adulterada con aceite. Podemos observar la presencia de grasas:
3º) Disolución de heces adulterada con harina. Podemos observar la presencia de granos de almidón:
LECTURA DE RESULTADOS
Las proteínas se observan en fresco. Cuando están bien digeridas, se aprecian como elementos de color amarillo-oro de contornos redondeados, sin estrías. Si están mal digeridas, podremos observar trozos grandes, rectangulares, con estrías longitudinales y transversales, con bordes angulosos y de color marrón oscuro.
En el porta con el lugol, observaremos el estado de digestión de los hidratos de carbono. Los hidratos de carbono, bajo la forma de granos de almidón, se tiñen de color azul-violáceo o negro.
En el porta caliente con solución de Sudán III sin ácido acético podemos observar la presencia de grasas neutras (TG) y ácido grasos. Los TG aparecen como glóbulos redondos de color rojo-anaranjado. Los ácidos grasos se ven como espículas de color rojo que tienden a formar asteriscos o estrellas a medida que se enfría la preparación.
Además, podemos observar la presencia de restos vegetales no digeribles, parénquimas vegetales, pelos animales y vegetales, etc. Esto forma parte de un proceso de digestión normal y no suele informarse.
INTERPRETACIÓN CLÍNICA DE LOS RESULTADOS OBTENIDOS
Si encontramos fragmentos de carne sin digerir, puede ser indicativo de una insuficiencia gástrica; si encontramos fragmentos de féculas, puede indicar insuficiencia gástrica y pancreática o escasa permanencia en el colon (tránsito intestinal acelerado); la presencia de moco, sangre o pus puede ser indicativo de una colitis ulcerosa o de disentería bacilar.
La presencia de grasa abundante (TG, ácidos grasos y jabones) con fibras musculares sin digerir puede indicar deficiencia del páncreas; la presencia de grandes cantidades de almidón mal digerido indica un tránsito acelerado del colon.
PRÁCTICA Nº14: "ESTUDIO MICROSCÓPICO DE PRINCIPIOS INMEDIATOS EN HECES"
OBJETIVO
- Observar una muestra de heces macroscópica y microscópicamente.
La investigación de los principios inmediatos que aparecen digeridos en las heces debe realizarse a nivel macroscópico y microscópico.
En una primera etapa, se realiza un análisis a simple vista de las heces (macroscópico),
extendiendo una porción de la muestra sobre una placa de Petri y
observando su consistencia, color, olor y forma. También
se buscan trozos de carne, fragmentos de fécula, grasas neutras, moco,
pus y sangre que puedan darnos alguna indicación de anormalidad de digestión. Es importante tener en cuenta la existencia de elementos que pueden entorpecer este análisis, como es la presencia de artefactos (trozos de papel o chicles que tragan los niños) o restos alimenticios difícilmente digeribles (cubiertas de plástico de embutidos, restos vegetales, etc.). Para un correcto análisis, es conveniente que el paciente siga una dieta normal, pero indicándole que debe contener todos los principios inmediatos: grasas, proteínas e hidratos de carbono. Esto lo hará como mínimo durante 2-3 días seguidos y la muestra se recogerá el último día.
UTILIDAD CLÍNICAEl análisis de las heces de un paciente puede darnos información sobre la función digestiva, así como valiosas orientaciones diagnósticas que van desde la detección precoz de un carcinoma de colon-recto (sangre oculta en heces), hasta la identificación de síndromes de malabsorción (grasa en heces).
FUNDAMENTO
En las heces podemos observar con facilidad el grado de digestión de los distintos principios inmediatos, de modo que este examen microscópico es de gran ayuda en el diagnóstico de los distintos tipos de patologías relacionadas con el proceso de la digestión.
APARATAJE
- Microscopio óptico.
- Agitador vórtex.
- Pipetas Pasteur.
- Tubos de centrífuga graduados de 13 mL.
- Agua destilada.
- Portaobjetos.
- Cubreobjetos.
- Gradilla.
- Vaso precipitados de 100 mL.
- Pipeta automática de 1000-5000 microlitros y puntas de 5000 microlitros.
- Vidrio de reloj y espátula.
- Lugol.
- Sudán III sin ácido acético.
- Heces frescas recogidas con un máximo de 12 horas antes del análisis y conservadas refrigeradas a 4ºC.
1) PREPARACIÓN REACTIVOS
- Lugol:
Usamos una dilución al 1/3 con 5 mL de Lugol y 10 mL de agua destilada y lo mezclamos bien en un matraz Erlenmeyer. Posteriormente fue alicuotado para cada grupo de la clase.
- Sudán III:
Se han mezclado 0.5 g de Sudan III con 45 mL de etanol 96º. Posteriormente, calentar brevemente en el microondas y dejar enfriar. Una vez frío, filtrarlo y realizar alícuotas para cada grupo de clase.
2) TÉCNICA
- En un tubo de centrífuga de 13 mL con unos 10 mL de agua destilada, depositamos una pequeña cantidad (del tamaño de un garbanzo) de las heces con una pipeta Pasteur, y las homogeneizamos agitando con ayuda del vórtex.
- Coger 3 mL del tubo homogeneizado con una pipeta Pasteur y depositar en 2 tubos de ensayo de 10 mL cada uno.
- Echar en uno de los tubos de ensayo una gota de aceite (para que haya presencia de grasas); y en otro tubo de ensayo un poco de harina (presencia de almidón).
- Tomar una gota de la disolución normal (sin adulterar) y depositarla en un portaobjetos para su examen en fresco. Tapar con cubreobjetos.
- Tomar una gota de la disolución con aceite y depositarla en un portaobjetos junto con 1-2 gotas de Sudán III sin ácido acético. Tapar con cubreobjetos y calentar suavemente sobre la llama de un mechero.Observar la preparación en caliente.
- Tomar una gota de la disolución con harina y depositarla en un portaobjetos junto con 1-2 gotas de lugol. Tapar con cubreobjetos.
- Visualizar las 3 preparaciones al microscopio óptico con el objetivo de 40x.
1º) Disolución de heces sin adulterar (en fresco). Se observan fibras vegetales:
2º) Disolución de heces adulterada con aceite. Podemos observar la presencia de grasas:
3º) Disolución de heces adulterada con harina. Podemos observar la presencia de granos de almidón:
LECTURA DE RESULTADOS
Las proteínas se observan en fresco. Cuando están bien digeridas, se aprecian como elementos de color amarillo-oro de contornos redondeados, sin estrías. Si están mal digeridas, podremos observar trozos grandes, rectangulares, con estrías longitudinales y transversales, con bordes angulosos y de color marrón oscuro.
En el porta con el lugol, observaremos el estado de digestión de los hidratos de carbono. Los hidratos de carbono, bajo la forma de granos de almidón, se tiñen de color azul-violáceo o negro.
En el porta caliente con solución de Sudán III sin ácido acético podemos observar la presencia de grasas neutras (TG) y ácido grasos. Los TG aparecen como glóbulos redondos de color rojo-anaranjado. Los ácidos grasos se ven como espículas de color rojo que tienden a formar asteriscos o estrellas a medida que se enfría la preparación.
Además, podemos observar la presencia de restos vegetales no digeribles, parénquimas vegetales, pelos animales y vegetales, etc. Esto forma parte de un proceso de digestión normal y no suele informarse.
INTERPRETACIÓN CLÍNICA DE LOS RESULTADOS OBTENIDOS
Si encontramos fragmentos de carne sin digerir, puede ser indicativo de una insuficiencia gástrica; si encontramos fragmentos de féculas, puede indicar insuficiencia gástrica y pancreática o escasa permanencia en el colon (tránsito intestinal acelerado); la presencia de moco, sangre o pus puede ser indicativo de una colitis ulcerosa o de disentería bacilar.
La presencia de grasa abundante (TG, ácidos grasos y jabones) con fibras musculares sin digerir puede indicar deficiencia del páncreas; la presencia de grandes cantidades de almidón mal digerido indica un tránsito acelerado del colon.
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